Старообрядцы (староверы) в Киеве жили с конца XVIII века. Религиозная община сформировалась в 1811 году после приезда в Киев нескольких русских купцов-староверов. Один из них, - Попов, приобрёл возле Флоровского монастыря дом, в котором с 1818 года происходили тайные, а с 1826 года и открытые богослужения.
Храм выстроен в конце 19 века (1897 год) по проекту архитектора Казанского. Первоначально именовался Вознесенским. До него здесь существовал молитвенный дом, но без крестов снаружи, чтобы не дразнить власти, но с освященным престолом. В храме более 300 уникальных икон и очень красивый иконостас.